Лабораторна робота №4 «Оцінка санітарного стану різних обєктів методом обліку

Лабораторна робота №4

«Оцінка санітарного стану різних обєктів методом обліку

колоній»

Мета роботи:

1.    Навчитися визначати санітарний стан об’єктів навколишнього середовища (повітря, води, ґрунту, харчових продуктів, поверхонь) методом обліку колоній мікроорганізмів.

2.    Освоїти методику посіву зразків на тверді поживні середовища.

3.    Вивчити основи кількісної оцінки мікробного обсіменіння.

 

Теоретична частина

1.  Значення санітарної мікробіології:

Санітарний стан об’єктів навколишнього середовища є важливим показником здоров’я населення. Наявність мікроорганізмів у повітрі, воді, на поверхнях або продуктах харчування може свідчити про ризик інфекційних захворювань. Методи мікробіологічного контролю дозволяють оцінити рівень обсіменіння та вжити необхідних заходів.

 

2.  Метод обліку колоній:

Облік колоній (КУО – колонієутворюючі одиниці) – це кількісний метод визначення мікроорганізмів у зразках. Він передбачає висівання зразка на поживне середовище з подальшим підрахунком колоній після інкубації.

 

3.  Основні об’єкти дослідження:

•        Повітря: Санітарна оцінка в приміщеннях чи на відкритих територіях.

•        Вода: Аналіз питної води, відкритих водойм, стічних вод.

•        Поверхні: Контроль чистоти робочих поверхонь у закладах харчування, лікарнях, лабораторіях.

•        Продукти харчування: Оцінка якості молока, м’яса, овочів тощо.

 

4. Етапи методу обліку колоній:

•  Відбір зразків із досліджуваного об’єкта.

•  Посів зразка на тверде поживне середовище.

•  Інкубація для росту мікроорганізмів (24-48 годин).

•  Підрахунок колоній на середовищі.

 

5. Поживні середовища:

•  МПА (м’ясо-пептонний агар): Для загальної кількості бактерій.

•  Сабуро: Для грибів і дріжджів.

•  Середовище Ендо: Для кишкових бактерій.

 

Матеріали та обладнання:

1.  Чашки Петрі з твердим поживним середовищем (МПА).

2.  Стерильний фізіологічний розчин (0,9% NaCl).

3.  Стерильні ватні тампони, шпателі або інокуляційні петлі.

4.  Стерильні піпетки.

5.  Пальник або ламінарний бокс для стерильності.

6.  Лічильник колоній (за відсутності – звичайний маркер).

7.  Термостат (25–37°C).

 

Хід роботи:

За допомогою інтернет-джерел провести оцінку санітарного стану різних обєктів методом обліку колоній зробивши відповідні висновки

Етап 1. Відбір зразків

1. Поверхні:

•        Змочіть стерильний ватний тампон у фізіологічному розчині.

•        Проведіть тампоном по досліджуваній поверхні (площа ~10×10 см).

•        Тампон помістіть у стерильну пробірку або одразу виконайте посів на поживне середовище.

2. Повітря:

•                 Відкрийте чашку Петрі з МПА на 10–15 хвилин у досліджуваному приміщенні.

•                 Закрийте чашку та позначте її місце і час експозиції.

3. Вода:

•                 Наберіть 1 мл досліджуваної води стерильною піпеткою.

•                 Виконайте висів на чашку Петрі, рівномірно розподіливши зразок за допомогою шпателя.

 

Етап 2. Посів зразків на поживне середовище

1.             У стерильних умовах (під полум’ям пальника або в ламінарному боксі) виконайте штриховий або суцільний висів зразка на поверхню поживного середовища.

2.             Для рівномірного розподілу використовуйте стерильний шпатель.

 

Етап 3. Інкубація

1.             Помістіть чашки Петрі у термостат при температурі 25–37°C (залежно від досліджуваного об’єкта).

2.             Залиште чашки в термостаті на 24–48 годин.

 

Етап 4. Облік колоній

1.             Після інкубації витягніть чашки та розгляньте їхню поверхню.

2.             Підрахуйте кількість колоній на середовищі.

3.             Якщо колонії розташовані густо, розділіть поверхню чашки на сектори та підрахуйте кількість у кожному секторі, потім розрахуйте загальну кількість.

4.             Для води обчисліть кількість КУО на 1 мл зразка, для поверхонь — на 1 см².

 

Етап 5. Аналіз отриманих результатів

1.             Порівняйте отримані результати з нормативами (додаткові таблиці додаються за потреби).

2.             Визначте санітарний стан досліджуваного об’єкта.

Результати спостережень:

 

У таблиці вкажіть:

•  Об’єкт дослідження (повітря, вода, поверхня).

•  Кількість колоній (КУО/см² або КУО/мл).

•  Візуальний опис колоній (форма, колір, розмір).

Об’єкт	Кількість КУО	Візуальний опис колоній	Норма (КУО)	Висновок
Повітря:
Вода
Поверхні
Продукти харчування

Контрольні питання:

1.   Що таке КУО і яке його значення для санітарного контролю?

2.   Як правильно відбирати зразки для дослідження?

3.   Які поживні середовища використовуються для культивування мікроорганізмів?

4.   Які методи стерилізації необхідно використовувати під час роботи з мікроорганізмами?

5.   Як результати дослідження допомагають оцінити санітарний стан об’єкта?

 

Звіт про виконання роботи:

1.   Мета: Вказати, що було досліджено.

2.   Хід роботи: Описати всі виконані етапи.

3.   Результати спостережень: Таблиця з даними про кількість колоній.

4.   Висновок: Визначення санітарного стану кожного об’єкта, порівняння з нормативами.

5.   Відповіді на контрольні питання