Лабораторна робота №3 Культивування мікроорганізмів. Вивчення чистих культур

Мета роботи

1.   Ознайомитися з методами культивування мікроорганізмів у лабораторних умовах.

2.   Вивчити процес отримання чистих культур.

3.   Розвинути навички роботи з поживними середовищами та дотримання стерильності.

Теоретична частина

1.   Чиста культура мікроорганізмів:

Чиста культура — це культура мікроорганізмів, яка складається з одного виду бактерій чи грибів. Вона використовується для вивчення властивостей конкретного мікроорганізму, його фізіології, біохімічної активності та ролі у природі чи хворобах.

2.   Методи культивування мікроорганізмів:

•                     Поверхневий метод: Мікроорганізми висіваються на поверхню твердого поживного середовища (наприклад, агару) у чашках Петрі або пробірках.

•                     Занурений метод: Культура росте в рідкому середовищі, де мікроорганізми рівномірно розподіляються в об’ємі.

3. Основні поживні середовища:

•  М’ясо-пептонний агар (МПА): Служить для вирощування бактерій.

Складається з білків, мінеральних солей та агару.

•  М’ясо-пептонний бульйон (МПБ): Використовується для вирощування бактерій у рідкому середовищі.

•  Середовище Сабуро: Призначене для культивування грибів.

4. Методи отримання чистих культур:

•                     Штриховий метод: Культура мікроорганізмів розподіляється інокуляційною петлею на поверхні твердого середовища послідовними штрихами. У результаті окремі клітини розташовуються ізольовано, утворюючи чисті колонії.

•                     Метод розведень: Зразок багаторазово розводиться у рідкому середовищі, потім висівається на твердий агар для виділення окремих колоній.

5. Умови стерильності:

Під час роботи з мікроорганізмами необхідно дотримуватись правил асептики:

•  Використовувати стерильний інструмент (інокуляційну петлю, шпателі).

•  Стерилізувати поживні середовища в автоклаві або водяній бані.

•  Працювати у стерильному середовищі (наприклад, біологічний бокс або під полум’ям пальника).

Хід роботи

2. Підготовка до роботи (віртальна)

•  Ознайомтеся з будовою інокуляційної петлі та принципом її стерилізації (на вогні чи в автоклаві).

•  Вивчіть склад поживних середовищ і їх призначення:

•  М’ясо-пептонний агар (МПА) — для культивування бактерій.

•  Сабуро — для грибів.

3. Культивування мікроорганізмів допомогою відео виконайте:

•                     Підготовка поживного середовища: Перегляньте відео, як заливають агар у чашки Петрі та стерилізують їх.   • Висів мікроорганізмів на МПА: 

•                     Перегляньте, як виконується перехресний штрих на чашці Петрі для ізоляції чистих колоній.

4. Вивчення чистих культур

•  Після інкубації мікроорганізмів вивчіть отримані колонії.

•  Оцініть їхній розмір, форму, колір, консистенцію.

•  Зробіть висновки щодо однорідності культур (чистота колоній).

Контрольні питання:

1.   Що таке чиста культура мікроорганізмів, і чому важливо її отримати?

2.   Які методи використовуються для стерилізації інструментів і середовищ?

3.   Чому важливо дотримуватися стерильності при роботі з мікроорганізмами?

4.   Що таке штриховий метод висіву, і для чого він використовується?

5.   Як за зовнішнім виглядом колоній визначити, чи є культура чистою?